期刊简介
本刊是全国性肿瘤学术期刊（双月刊）。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有：肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。
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首页>中国癌症杂志
- 杂志名称：中国癌症杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属肿瘤医院
- 国际刊号：1007-3639
- 国内刊号：31-1727/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
干扰基因BMI-1表达对食管癌细胞放射敏感性的影响
杨兴肖；李幼梅；宋姮；刘志坤；马鸣；祝淑钗
关键词：Bmi-1基因, RNA干扰, X射线照射, 放射敏感性, p16基因, CDK4基因
摘要：背景与目的：B细胞特异性的莫洛尼白血病毒插入位点1(B-cell-specific Moloney leukemia virus insertion site 1，BMI-1)期在放疗后DNA损伤中发挥重要作用。该研究采用siRNA干扰技术降低食管癌TE13细胞中BMI-1基因表达，探讨BMI-1的表达对X射线照射后食管癌细胞放射敏感性的影响。方法：针对BMI-1 mRNA序列，3对有效的干扰序列(siRNA1、siRNA2和siRNA3)和阴性对照序列由公司设计合成，瞬时转染食管癌TE13细胞，命名为BMI-1 siRNA1、BMI-1 siRNA2和BMI-1 siRNA3共3组，转染阴性对照序列组命名为NC组，未转染组命名为对照组。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测TE13各组中BMI-1在mRNA和蛋白水平的表达。采用MTT法检测BMI-1基因转染对TE13细胞增殖能力的影响。克隆形成实验检测BMI-1对TE13放射敏感性的作用。流式细胞术测定siRNA干扰BMI-1基因对细胞周期和凋亡分布的影响。RT-PCR和Western blot检测细胞内p16、CDK4基因和蛋白表达水平。结果：3对干扰序列使人BMI-1基因在mRNA和蛋白表达水平低于对照组和NC组，尤以siRNA3组效果明显。选择siRNA3作为干扰组进行MTT和流式细胞术。MTT结果表明，BMI-1 siRNA3转染后BMI-1的低表达对细胞的增殖能力无明显影响；克隆形成实验的结果显示，空白对照组、NC组、干扰组的D0分别为2.514、2.506和1.761 Gy；Dq值分别为2.694、2.664和2.122 Gy；外推数N值分别为2.920、2.895和3.336；SF2值分别为0.8268、0.8231和0.6255，可见对照组和空载组间放射敏感性差异无统计学意义(P>0.05)，而干扰组细胞的放射敏感性高于对照组和NC组；流式细胞术分析显示，6 Gy照射后，BMI-1 siRNA组G0/G1期比例明显高于对照组和空载组，G2/M期显著低于对照组和NC组，而未照射时BMI-1的低表达对细胞周期无明显影响。干扰BMI-1基因后TE13细胞p16基因和蛋白水平升高(P<0.01)，CDK4基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论：siRNA干扰技术有效地抑制了食管癌细胞TE13中BMI-1基因的表达，联合X线照射后显著消除了细胞周期在G2/M期的阻滞，增加了食管癌的放射敏感性，其诱导作用与p16和CDK4基因和蛋白表达有关。
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