期刊简介
本刊是全国性肿瘤学术期刊（双月刊）。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有：肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。
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首页>中国癌症杂志
- 杂志名称：中国癌症杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属肿瘤医院
- 国际刊号：1007-3639
- 国内刊号：31-1727/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
RNA干扰Apollon基因逆转白血病K562细胞多药耐药
贾秀红；孝飞飞；李建厂
关键词：白血病, RNA干扰, Apollon基因, 多药耐药性, 细胞凋亡, K562细胞
摘要：背景与目的：Apollon基因在白血病等多种肿瘤内高表达。本试验通过构建高效干扰Apollon基因的短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)真核表达载体，探讨RNA干扰技术能否逆转人髓系白血病K562细胞多药耐药。方法：构建靶向Apollon基因真核表达载体pGPHI-GFP-Neo-Apollon，应用LipofectamineTM2000转染K562细胞，G418稳定筛选。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、细胞免疫荧光法分别检测重组载体稳定转染K562细胞后Apollon mRNA及蛋白的表达情况；四甲基偶氮唑盐(MTT)、流式细胞术检测细胞转染前后对长春新碱(leurocristine，VCR)、足叶乙苷(etoposide，VP16)的敏感性及凋亡率的变化。结果：成功构建了pGPHI-GFP-Neo-Apollon载体并在K562细胞内稳定表达的细胞克隆，经G418筛选后，重组载体能有效沉默Apollon的表达，Apollon mRNA及蛋白表达水平明显下降。MTT结果显示，基因干扰组细胞对VCR、VP16的敏感性明显增强，其半数抑制浓度(half-inhibitory，IC50)值分别为(0.144±0.018)mg/L、(17.336±3.571) mg/L，明显低于细胞对照组(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明，基因干扰组细胞联合化疗药物后细胞凋亡率显著升高(P<0.05)，而转染阴性对照组细胞凋亡率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：pGPHI-GFP-Neo-Apollon载体能显著增强VCR和VP16对白血病K562细胞的诱导凋亡作用，提高K562细胞对化疗药物的敏感性，提示RNA干扰Apollon基因表达能一定程度逆转白血病细胞的多药耐药。
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