期刊简介

               本刊是全国性肿瘤学术期刊(双月刊)。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有:肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。

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  • 杂志名称:中国癌症杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:复旦大学附属肿瘤医院
  • 国际刊号:1007-3639
  • 国内刊号:31-1727/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录:维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国癌症杂志2009年第12期

靶向尿激酶受体uPAR基因的shRNA表达载体的构建及鉴定

王静;陈健;马铭;赵媛;张洁

关键词:uPAR, 短发夹RNA, 舌鳞状细胞痛, 真核表达载体
摘要:背景与目的:尿激酶受体(uPAR)与肿瘤的侵袭和转移密切相关,抑制uPAR的表达,可以抑制肿瘤的转移.本研究构建uPAR基因短发夹RNA(shRNA)的表达质粒,为舌鳞状细胞癌RNA干涉(RNAi)介导的基因治疗打下基础.方法:根据GenBank数据库提供的uPAR基因序列,选择设计合成能转录shRNA的DNA序列,将它们插入真核表达载体pWH1构建重组质粒,用酶切的方法进行鉴定;后将构建成功的特异性表达载体(pWH1-uPAR)转染至舌鳞状细胞癌,通过RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot观察其对舌鳞状细胞痛uPAR mRNA和蛋白水平表达的影响.利用MTT实验检测细胞增殖能力的变化.结果:成功构建了uPAR shRNA表达载体;与Ts细胞和转染空载体pWH1的Ts细胞相比,转染pWH1-uPAR表达载体的Ts细胞uPAR mRNA和蛋白的表达明显降低.MTT结果显示uPAR shRNA对Ts细胞增殖的抑制率为32.9%.结论:设计构建的真核表达载体可以特异性干扰uPAR基因的表达,为进一步研究uPAR基因的功能和舌鳞状细胞癌治疗提供有效的方法和手段.