期刊简介
本刊是全国性肿瘤学术期刊（双月刊）。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有：肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。
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首页>中国癌症杂志
- 杂志名称：中国癌症杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属肿瘤医院
- 国际刊号：1007-3639
- 国内刊号：31-1727/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
真核细胞内外源性HPV16 E7癌基因表达及其对cdc25A及Cyclin E表达的影响
戴淑真；田甜；孔守芳；黄丽丽；罗兵
关键词：腺病毒, 人乳头状瘤病毒16, Hela细胞, E7基因, 细胞周期蛋白E, Cdc25A
摘要：背景与目的:人乳头状瘤病毒(HPV)感染及其引发的抑癌基因功能丧失和细胞周期调控失调是宫颈癌发病的重要因素.HPV16诱发宫颈癌的机制主要与其两个早期开放读码框架E6、E7转化基因密切相关.HPVE6、E7引起细胞生长和增殖异常,同时伴有Cyclin A、Cyclin D1、CDK4等细胞周期蛋白的表达异常.本研究采用体外基因转染技术将HPV 16 E7基因转入靶细胞,通过对目的基因瞬时表达的检测,进而观察在E7病毒癌蛋白的影响下调控G1/S检验点的几种细胞周期调节蛋白的表达,以探讨HPV16型E7基因外源性表达对子宫颈癌HeLa细胞细胞周期调节因子cdc25A及细胞周期蛋白E(Cyclin E)的影响.方法:从宫颈癌标本中经PCR扩增回收HPV16E7基因片段,将其插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1构建重组腺病毒基因组Ad-E7.用脂质体介导Ad-E7导入包装细胞人胚肾细胞系HEK-293细胞,包装出完整腺病毒颗粒.测定病毒上清液滴度,感染体外培养的HeLa细胞.采用RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞cdc25A的mRNA表达的差异;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测转染前后Cyclin E表达的差异.结果:荧光显微镜下,转染后HEK-293细胞和HeLa细胞表达绿色荧光蛋白.RT-PCR结果显示转染后,HeLa细胞cdc25A的mRNA含量较转染前显著增加[感染前灰度值0.23±0.10,感染后0.87±0.22(P＜0.01)],LSCM检测结果显示转染后Cyclin E表达较转染前明显增加.结论:重组腺病毒可以成功介导外源性HPV16E7基因在HeLa细胞内表达,HPV16E7基因促进HeLa细胞周期调节因子cdc25A和Cyclin E的表达.
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