期刊简介
本刊是全国性肿瘤学术期刊（双月刊）。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有：肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。
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首页>中国癌症杂志
- 杂志名称：中国癌症杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属肿瘤医院
- 国际刊号：1007-3639
- 国内刊号：31-1727/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
化学合成siRNA对宫颈癌细胞SiHa中E6基因表达的抑制作用
袁月秀；王言奎；罗兵；殷广洁
关键词：宫颈癌, 人乳头瘤病毒, E6基因, RNA干扰
摘要：背景与目的:宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(human papilloma virus)HPV16 E6、E7癌基因密切相关,人们曾采用核酶或E6、E7反义寡核苷酸抑制其表达,然而,上述两种方法存在费时、费力、抑制效率不高和维持时间短的问题.本研究拟探讨化学合成siRNA对HPV16阳性SiHa细胞E6基因表达的抑制作用以及对靶细胞的影响.方法:化学合成3条靶向HPV16 E6基因的siRNA,用脂质体法转染SiHa细胞,同时设立脂质体对照.采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测siRNA作用后E6 mRNA水平的变化;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞技术(FCM)、免疫组化以及透射电镜技术(TEM)分别对细胞增殖活性、细胞周期、p53蛋白水平以及细胞超微结构的改变进行检测分析.结果:3条siRNA均能有效抑制E6 mRNA的转录表达,以siRNA1作用效果为明显.MTT检测结果显示20、50和80 nmol/L终浓度转染后细胞增殖活性均有所下降,其中以50 nmol/L转染时增殖活性下降明显.流式细胞术检测结果显示转染后G0/G1期细胞数占生长周期细胞数的比例增多,即表现为G1期阻滞,S期细胞的比例降低;免疫组化法检测对照组细胞P53蛋白灰度平均值为0.43±0.03,转染72 h后细胞p53蛋白灰度平均值为0.75±0.06,差异有显著性(P〈0.05);转染72 h后透射电镜下可见细胞细胞质浓缩,胞质中出现空泡.结论:化学合成siRNA可有效沉默SiHa细胞E6基因的转录表达,进而导致细胞生物学行为的改变.
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