期刊简介
本刊是全国性肿瘤学术期刊（双月刊）。读者对象为从事肿瘤防治、研究的工作者和高、中级卫生人员。报道内容有：肿瘤的临床研究、基础研究、防治、调查报告、综述、临床病理讨论、最新动态、病例报道和简讯等。
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首页>中国癌症杂志
- 杂志名称：中国癌症杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：复旦大学附属肿瘤医院
- 国际刊号：1007-3639
- 国内刊号：31-1727/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技核心期刊及全国肿瘤类核心期刊期刊收录：维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
含Egr-1启动子和Smad7基因的重组腺病毒的构建
蔡旭伟；杨健；傅小龙
关键词：腺病毒, Egr-1启动子, Smad7, 基因治疗
摘要：目的:构建含Egr-1启动子和Smad7 cDNA的重组复制缺陷型腺病毒并初步验证其活性,为下一步的基因治疗奠定基础.方法:以Adeno-XTM表达试剂盒为基础,应用分子克隆技术,将穿梭质粒pShuttle的CMV启动子替换为Egr-1启动子,再将Smad7 cDNA亚克隆至穿梭质粒内,然后与腺病毒DNA重组,转化大肠杆菌E.coli DH5α,PCR鉴定正确即为pAdES.脂质体法转染HEK293细胞,包装出完整腺病毒,然后大量扩增测定滴度.重组腺病毒感染成纤维细胞(3T6),经深部X线照射后通过免疫细胞化学方法检测Smad7蛋白在细胞内的表达定位.结果:经酶切、PCR及测序鉴定证实成功构建了含Egr-1启动子和Smad7的重组复制缺陷型腺病毒pAdES.病毒滴度为1.0×1011 TCID50/ml.细胞免疫化学结果显示Smad7蛋白表达定位于细胞质内.结论:利用Adeno-XTM表达试剂盒,通过分子克隆体外重组技术可以方便的构建重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞内成功包装和扩增.通过重组腺病毒可在细胞质内表达外源性Smad7蛋白.
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